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Tissuelyser-24實(shí)驗(yàn)案例(快速提取DNA或RNA)
TissueLyser -24是小型的采用研磨珠的破碎儀,可同時(shí)快速處理24個(gè)樣品 TissueLyser-24/48
優(yōu)點(diǎn): ■ 可同時(shí)破碎多至24個(gè)樣品 ■ 樣品適配器可在干冰或液氮中預(yù)冷,以避免生物分子降解 ■ 能處理多種樣品,結(jié)果重現(xiàn)性高處理多至24個(gè)樣品
TissueLyser -24 裝配上適配器就可以工作了,在2ml 的離心管\中加入樣品和一粒研磨珠,多至24個(gè)樣品,然后將管子放入適配器,將適配器擰緊到TissueLyser -24的活塞上,活塞上下快速的震動(dòng)使得研磨珠在樣品管中震動(dòng)而將樣品磨碎并勻質(zhì)化。破碎的效果與廣泛使用的TissueLyser II(美國(guó)QIAGEN) 相當(dāng)(圖5、7-9 ),常規(guī)組織使用5 mm鋼珠,必要時(shí)可多加1粒,研磨珠與進(jìn)口的研磨機(jī)通用

圖5. 高效破碎組織。各種大鼠的組織使用TissueLyser-24(LT) 和 TissueLyser II 分別破碎A在QIAcube 上使用DNeasy Blood & Tissue Kit 來(lái)純化25mg 樣品中的DNA ,產(chǎn)量用分光光度 計(jì)測(cè)量。B在QIAcube 上使用RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮膚, 心臟, 肺) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (腦)。來(lái)純化20mg 樣品中的RNA ,產(chǎn)量用分光光度計(jì)測(cè)量。

圖6. 高RIN 值表明RNA 高純度和完整性。大鼠心臟和肺(各20mg )使用TissueLyser -24(LT) 破碎后,在QIAcube 上使用 RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit 純化RNA, 用Agilent 2100 bioanalyzer 來(lái)分析RIN 值分別為8.3 (心臟)和9 (肺)。

圖7. 完整的蛋白質(zhì)用于各種分析。各種大鼠組織(各25 mg )經(jīng)Allprotect Tissue Reagent 穩(wěn)定后使用TissueLyser-24(LT)或TissueLyser II 破碎,然后使用Qproteome Mammalian Protein Prep Kit 抽提總蛋白,用western blotting 檢測(cè)。A 轉(zhuǎn)膜后用Ponceau S 染色 B western Blot 檢測(cè)。LT: TissueLyser -24(LT) ;II: TissueLyser II; M: 分子量標(biāo)記。

